氨基磁珠的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的磁珠微球產(chǎn)品，本制品用于科學(xué)研究，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價位合理，需要氨基磁珠等磁珠微球產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括氨基磁珠(2μm,10mg/ml)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：氨基磁珠(2μm,10mg/ml)
產(chǎn)品貨號：CZ031
產(chǎn)品規(guī)格：5ml/50ml

產(chǎn)品簡介：
Mag NH2系列磁珠具有超順磁性、快速磁響應(yīng)性、豐富氨基官能團(tuán)、單分散性和亞微米尺度粒徑等特點(diǎn)，能夠在特殊化學(xué)試劑(如戊二醛)的作用下將多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物配體共價偶聯(lián)到微球表面，是醫(yī)學(xué)與分子生物學(xué)研究中重要的載體工具。
NH2系列磁珠采用的高分子聚合技術(shù)將超順磁性材料和高分子材料地結(jié)合在一起，形成的一種功能化磁性微球。與傳統(tǒng)磁珠相比，Magrose具有更快的磁響應(yīng)性同時保持微球良好的分散性、低的非特異性吸附和更豐富的結(jié)合位點(diǎn)等特性，能便捷地與多種生物配體(蛋白、多肽、寡聚核苷酸、藥物分子等)進(jìn)行高載量結(jié)合，可作為良好的基礎(chǔ)材料進(jìn)行包被、吸附、化學(xué)改性等后續(xù)處理。
保質(zhì)期：在2～8℃可穩(wěn)定保存，保質(zhì)期2年
產(chǎn)品：
1. 豐富的結(jié)合位點(diǎn)，加強(qiáng)與配體的特異性結(jié)合。
2. 超順磁性和高磁響應(yīng)性，節(jié)省操作時間。
3. 良好的分散性和重懸性，提高操作的便捷性。
4. 良好的物理化學(xué)穩(wěn)定性，保障重復(fù)性效果。
磁珠與生物分子的偶聯(lián)方法(參考，以蛋白A為例)：
1. 磁珠預(yù)處理：混勻磁珠后，取100 μL Mag / Magrose磁珠到1 mL EP管中，磁吸去除上清液，用200 μL PBS溶液(50 mM PBS，pH 7.4)洗滌3次，磁吸去上清；
2. 戊二醛活化：加入新鮮配制的100 μL戊二醛溶液(15%)到EP管中，漩渦混勻使磁珠充分懸浮，用錫箔紙包裹后25℃反應(yīng)1 h(反應(yīng)避光，以避免戊二醛自身發(fā)生聚合)，該期間保持磁珠的懸浮狀態(tài)(可利用垂直混合儀進(jìn)行顛倒混勻)；
3. 活化后洗滌：磁珠活化后，磁吸去上清，用50 mM PBS，pH 7.4緩沖液洗滌3次；
4. 磁珠偶聯(lián)：向裝有磁珠的EP管中加入50 μg～200 μg生物配體(合適用量及濃度需要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化，保持溶液pH≈8.0，必要時可加入0.05% Tween -20以提高磁珠分散性)，輕柔地混
勻；用錫箔紙包裹(反應(yīng)避光)后25℃偶聯(lián)3 h，或25℃偶聯(lián)1 h后放置4℃偶聯(lián)過夜，偶聯(lián)期間保持磁珠的懸浮狀態(tài)(可利用垂直混合儀進(jìn)行顛倒混勻)；
注：由于戊二醛溶液在280 nm出有吸收峰，因此磁珠上偶聯(lián)蛋白的結(jié)合含量不能通過反應(yīng)前后OD280值變化來計(jì)算，可通過BCA試劑盒或蛋白電泳法間接測量。
5. 偶聯(lián)后封閉：將EP管置于磁分離架上磁性分離去除上清液，加入200～1000 μL BSA/PBS溶液(pH 7.2，含5% BSA)重懸磁珠(可根據(jù)需要進(jìn)行超聲)，25℃反應(yīng)1 h封閉磁珠表面非特異性吸附位點(diǎn)，該期間保持磁珠的懸浮狀態(tài)(可利用垂直混合儀進(jìn)行顛倒混勻)；
6. 保存：將EP管置于磁性分離架上磁性分離去除上清液，用200 μL PBS溶液(pH 7.2)或保存溶液洗滌3次后，重新懸浮于保存溶液中(可根據(jù)需要來確定保存溶液的加入量，以調(diào)整偶聯(lián)配體磁珠的濃度)，zuì后保存于4℃。必要時可以在保存溶液中加入0.02%(w/v) 疊氮化鈉(NaN3)抑制細(xì)菌生長。
注意事項(xiàng)：
1. 冷凍、干燥和離心等操作會引起磁珠團(tuán)聚，不易于重懸和分散，并且影響磁珠表面功能基團(tuán)的化學(xué)活性。
2. 在使用本產(chǎn)品前，請務(wù)必充分振蕩或超聲使磁珠保持均勻的懸浮狀態(tài)。
3. 使用過程中可根據(jù)需求，用純化水或緩沖液磁吸洗滌磁珠 2～3次，以去除保存液中乙醇。
4. 本產(chǎn)品需與磁性分離設(shè)備配套使用。
5. 為保證zuì佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請選用合適的配體進(jìn)行共價偶聯(lián)反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品僅供研究使用。

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名稱：鈷離子螯和His-tag蛋白純化磁珠
貨號：CZ006
規(guī)格：5ml/2×50ml/4×250ml
產(chǎn)品簡介：
組氨酸標(biāo)簽蛋白純化磁珠具有超順磁性，專為、快速純化組氨酸標(biāo)簽蛋白而設(shè)計(jì)的一種功能化材料?？赏ㄟ^磁性分離方式直接從生物樣品中一步純化出高純度的目標(biāo)蛋白，大地簡化純化工藝和提高純化效率，適合科研和工業(yè)領(lǐng)域便捷地進(jìn)行組氨酸標(biāo)簽蛋白純化。
與傳統(tǒng)層析方式使用的金屬螯合瓊脂糖預(yù)裝柱相比，采用磁珠純化組氨酸標(biāo)簽蛋白，無需對樣品進(jìn)行多次長時間的高速離心和濾膜過濾、無需控制流速、更無需高昂的層析設(shè)備。樣品與磁珠的特異性結(jié)合、洗滌以及目標(biāo)蛋白的洗脫變得簡單、快速、易操作。對于熟練的操作者而言，在1 h內(nèi)就能獲得高純度的目標(biāo)蛋白，且能輕松實(shí)現(xiàn)高通量和大規(guī)模樣品的平行處理，為研究者節(jié)省了時間和成本。
本產(chǎn)品系列包括鎳離子(Nickel)、鈷離子(Cobalt)兩種金屬離子螯合磁珠，它們在目標(biāo)蛋白結(jié)合量和非特異性吸附等性能上有所區(qū)別，用戶可根據(jù)目標(biāo)蛋白與不同種類金屬的結(jié)合性能，以及對目標(biāo)蛋白的產(chǎn)量和純度的要求，選擇不同種類的金屬離子螯合磁珠。具體產(chǎn)品信息及規(guī)格參考《產(chǎn)品特性》。
保質(zhì)期 在2～8℃可穩(wěn)定保存，保質(zhì)期2年
注1：磁珠蛋白結(jié)合量與目標(biāo)蛋白特性有關(guān)，此處僅做參考值
注2：1 mL 磁珠懸液中包含100 μL磁珠
注3：磁珠溶劑耐受性請參考附錄信息
適用范圍：
適用于純化細(xì)菌、酵母、昆蟲和哺乳動物細(xì)胞等分泌或胞內(nèi)表達(dá)的可溶性組氨酸標(biāo)簽蛋白，也可用于變性蛋白的純化(包涵體需變性后再進(jìn)行純化)。
操作流程：
1. 緩沖液的準(zhǔn)備
目標(biāo)蛋白與組氨酸標(biāo)簽蛋白純化磁珠的結(jié)合性能將直接影響目標(biāo)蛋白的純化效率，而各種緩沖液配制也將在一定程度上影響目標(biāo)蛋白的回收率和純度。因此，在較大規(guī)模蛋白純化之前，用戶應(yīng)該自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，篩選出適合純化目標(biāo)蛋白的緩沖液體系，主要包括Binding Buffer、Washing Buffer、Elution Buffer。
增加咪唑濃度進(jìn)行洗脫是組氨酸標(biāo)簽純化磁珠zuì常用的洗脫方法，次使用時，在不確定zuì佳的洗脫咪唑濃度情況下，推薦在緩沖液中分別加入10 mM、20 mM、50 mM、100 mM、200 mM、300 mM、400 mM、500 mM咪唑，濃度從低到高分別洗脫，磁吸后收集蛋白上清液，之后通過SDS-PAGE電泳等方法鑒定洗脫結(jié)果。
以下提供的緩沖液體系適用于多數(shù)組氨酸標(biāo)簽蛋白的純化，供用戶參考。
Binding Buffer：20 mM Phosphate Buffer，500 mM NaCl，5～50 mM Imidazole，pH7.4
Washing Buffer：20 mM Phosphate Buffer，500 mM NaCl，50～100 mM Imidazole，pH7.4
Elution Buffer：20 mM Phosphate Buffer，500 mM NaCl，500 mM Imidazole，pH7.4
2. 樣品處理
本說明書提供以下三種樣品的處理方法：
(1)大腸桿菌、酵母等細(xì)胞內(nèi)表達(dá)蛋白：表達(dá)細(xì)胞用適量的Binding Buffer稀釋，加入蛋白酶抑制劑(如終濃度為1 mM的PMSF)，重懸細(xì)胞，冰浴超聲裂解細(xì)胞，即為粗蛋白樣品。如果樣品過于粘稠，可根據(jù)需要在粗樣品中加入適量核酸酶，冰浴30 min，以降解核酸。另外，用戶也可以根據(jù)實(shí)際需要對蛋白樣品進(jìn)行離心操作。
(2)胞外表達(dá)蛋白：取胞外表達(dá)上清，用等量Binding Buffer稀釋，即為粗蛋白樣品。
(3)動物細(xì)胞胞內(nèi)表達(dá)蛋白：取適量動物細(xì)胞，先用適量PBS洗滌1次，棄上清；接著用適量含1%(v/v)Triton X-100或1%(v/v)NP-40的Binding Buffer重懸，加入蛋白酶抑制劑(如終濃度為1 mM的PMSF)，冰浴10 min，即為粗蛋白樣品。
3. 磁珠預(yù)處理
一般情況下，磁珠的使用量是由用戶根據(jù)目標(biāo)蛋白產(chǎn)量和磁珠載量信息計(jì)算獲得。例如：采用大腸桿菌表達(dá)某目標(biāo)蛋白，500 mL發(fā)酵液收獲2 g濕重的菌體，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)估算其目標(biāo)蛋白產(chǎn)量為10～20 mg，用戶需要取5 mL磁珠懸液用于目標(biāo)蛋白的純化。以下即以此為例進(jìn)行詳細(xì)說明：
(1)將磁珠產(chǎn)品置于漩渦混勻器上充分混勻，用移液器取5 mL磁珠懸液于15 mL離心管中，進(jìn)行磁性分離*，棄上清液，從磁性分離器上取下離心管。
(2)加入5 mL Binding Buffer到上述裝有磁珠的離心管中，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠重新懸?。贿M(jìn)行磁性分離，移去上清液。重復(fù)洗滌2次。
(注*：在磁性分離過程中，為了減少磁珠在使用過程中的損耗，待溶液變澄清后，蓋緊離心管蓋子，保持離心管仍在磁性分離器上，手持磁性分離器與離心管上下翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使澄清的溶液涮洗離心管蓋上殘留的磁珠，靜置片刻，使溶液重新變澄清；以下同。)
4. 目標(biāo)蛋白與磁珠結(jié)合
(1)用10 mL Binding Buffer懸浮2 g濕重的菌體，進(jìn)行破碎和裂解之后，即為目標(biāo)粗蛋白樣品，加入到裝有預(yù)處理磁珠的離心管中，將離心管置于漩渦混勻器振蕩15 s。
(2)將離心管置于旋轉(zhuǎn)混合儀上，室溫旋轉(zhuǎn)混合20～30 min(如果需要，可以在2～8℃ 的低溫環(huán)境下，旋轉(zhuǎn)混1 h，防止目標(biāo)蛋白降解)。
(3)將離心管置于磁性分離器上進(jìn)行磁性分離，移出上清液至新的離心管中以備后續(xù)檢測，從磁性分離器上取下離心管進(jìn)行后續(xù)洗滌步驟。
5. 磁珠洗滌
(1)加入10 mL Washing Buffer到裝有磁珠的離心管中，輕輕翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠重新懸浮，磁性分離，移出清洗液到新的離心管中，以備取樣檢測。重復(fù)此步驟1次。
(2)加入10 mL Washing Buffer到裝有磁珠的離心管，使磁珠重新懸浮，將磁珠懸液轉(zhuǎn)移到新的離心管(避免原離心管壁上非特異性吸附蛋白污染目標(biāo)蛋白)，磁性分離，移出上清液到清洗液收集管。
6. 目標(biāo)蛋白洗脫
(1)用戶可根據(jù)需要改變洗脫體積調(diào)整目標(biāo)蛋白濃度，加入2～10 mL Elution Buffer，輕輕翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠懸浮，磁性分離，收集洗脫液到新的離心管中，即為純化的目標(biāo)蛋白樣品。
(2)如果需要，可以重復(fù)上述步驟1次，收集樣品到新的離心管中，以檢測目標(biāo)蛋白是否洗脫完全。
7. 磁珠后處理
(1)在裝有磁珠的離心管中加入5 mL Elution Buffer，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠懸浮，磁性分離，去除上清液。
(2)重復(fù)上述步驟2次。
(3)在離心管中加入5 mL ddH2O，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠懸浮，磁性分離，去除上清液。
(4)重復(fù)上述步驟2次。
(5)加入Storage Buffer到磁珠中使總體積為5 mL，保存于2～30℃(長期保存，置于2～8℃)，可用于下一次同種蛋白的純化。
8. 磁珠再生
磁珠連續(xù)使用三次以上，其結(jié)合目標(biāo)蛋白的能力可能會明顯降低，建議進(jìn)行磁珠再生處理。
Stripping Buffer：20 mM Sodium Phosphate，500 mM NaCl，100 mM EDTA，pH 7.4
Beads Washing Buffer(可選)：0.5 M NaOH，2 M NaCl
Recharge Buffer：100 mM NiSO4/CoCl2(該化學(xué)試劑有一定的毒性，可能造成過敏反應(yīng)，使用時務(wù)必注意)
Storage Buffer：20%(v/v)乙醇
以5 mL 10%(v/v)磁珠懸液為例，詳細(xì)說明磁珠再生操作：
(1)將磁珠懸液進(jìn)行磁性分離，去除上清液，從磁性分離器上取下離心管，在離心管中加入5 mL ddH2O，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠重新懸浮，磁性分離，去除上清液。
(2)加入5 mL Stripping Buffer，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠重新懸浮，室溫旋轉(zhuǎn)混合5 min，磁性分離，去除上清液。重復(fù)此步驟1次。
(3)加入5 mL ddH2O，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠重新懸浮，磁性分離，去除上清液，重復(fù)此步驟2次。
(4)堿處理：加入5 mL Beads Washing Buffer，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠重新懸浮，室溫旋轉(zhuǎn)混合5 min，磁性分離，去除上清液。加入5 mL ddH2O，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠重新懸浮，磁性分離，去除上清液。重復(fù) ddH2O洗滌步驟3～5次，至洗滌液呈中性為止。
(5)加入5 mL Recharge Buffer，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠重新懸浮，室溫旋轉(zhuǎn)混合20 min，磁性分離，去除上清液。
(6)加入5 mL ddH2O，上下翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次，使磁珠重新懸浮，磁性分離，去除上清液。重復(fù)此步驟4次以上，保證鎳離子去除完全。
(7)加入Storage Buffer到磁珠中使總體積為5 mL，保存于2～30℃(長期保存，置于2～8℃)。
蛋白純化流程的優(yōu)化：
以上操作流程適用于大部分組氨酸標(biāo)簽蛋白的純化，根據(jù)目標(biāo)蛋白與金屬離子螯合磁珠的結(jié)合性能不同，用戶可以從以下幾個方面對純化流程進(jìn)行優(yōu)化，以提高目標(biāo)蛋白的回收率和純度。
提高目標(biāo)蛋白回收率的參考方法：
(1)降低樣品溶液和Binding Buffer中的Imidazole濃度；
(2)樣品溶液和其它緩沖液中添加表面活性劑等物質(zhì)；
(3)添加合適的蛋白酶抑制劑，防止目標(biāo)蛋白降解；
(4)增加磁珠用量；
(5)延長蛋白與磁珠孵育的時間；
(6)延長洗脫目標(biāo)蛋白的時間或增加洗脫次數(shù)。
提高目標(biāo)蛋白純度的參考方法：
(1)提高樣品溶液和Binding Buffer中Imidazole、NaCl的濃度；
(2)樣品和緩沖液中添加表面活性劑等物質(zhì)；
(3)添加合適的蛋白酶抑制劑，防止目標(biāo)蛋白降解；
(4)延長洗滌的時間，增加洗滌次數(shù)；
(5)采用梯度Imidazole濃度洗脫目標(biāo)蛋白。
注意事項(xiàng)：
1. 次使用本產(chǎn)品前，請務(wù)必詳細(xì)閱讀本說明書；
2. 磁珠使用和保存過程中應(yīng)避免冷凍、干燥和高速離心等操作；
3. 在使用本產(chǎn)品前，請務(wù)必充分振蕩使磁珠保持均勻的懸浮狀態(tài)；
4. 請選用質(zhì)量好的移液器吸頭和離心管，以免磁珠貼壁或混合過程發(fā)生滲漏引起磁珠的損耗；
5. 磁珠與溶液混合過程中，如果溶液粘稠無法通過翻轉(zhuǎn)離心管重懸磁珠，可采用移液器反復(fù)吹吸或短時漩渦混合使磁珠充分重懸；
6. 用戶可根據(jù)實(shí)際需要保留經(jīng)磁性分離移去的上清液，進(jìn)行取樣檢測，以便分析純化過程和優(yōu)化蛋白純化流程；
7. 本產(chǎn)品可以重復(fù)使用，當(dāng)純化性能降低時，建議進(jìn)行再生處理；
8. 使用過的磁珠重復(fù)使用時，建議純化同種蛋白，純化不同種類的蛋白時，建議使用新的磁珠；
9. 本產(chǎn)品需與磁性分離器配套使用；
10. 本產(chǎn)品僅供研究使用。

關(guān)注氨基磁珠(2μm,10mg/ml)，2μm,10mg/ml，氨基磁珠(2μm,10mg/ml)，氨基磁珠，CZ031，百奧萊博，，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：


CZ005 鎳離子螯和His-tag蛋白純化磁珠 5ml/2×50ml/4×250ml
CZ017 2μm鏈霉親和素磁珠 1ml/10ml/100ml
CZ019 NHS磁珠 1ml/5ml/50ml
CZ022 羥基磁珠(500nm,10mg/ml) 5ml/50ml
CZ023 羥基磁珠(1000nm,10mg/ml) 5ml/50ml
CZ027 羧基磁珠(2μm,10mg/ml) 5ml/50ml
CZ028 羧基磁珠(5μm,10mg/ml) 5ml/50ml
CZ030 氨基磁珠(500nm) 5ml/50ml

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