植物RNA提取試劑盒的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的RNA提取純化產(chǎn)品，本制品僅用于生物化學(xué)研究方面，植物RNA提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)RNA提取純化之一，質(zhì)量堪比同類進口產(chǎn)品，價格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括植物RNA提取試劑盒(含DNA清除柱)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：植物RNA提取試劑盒(含DNA清除柱)
英文名稱：Plant RNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號：ALH036
產(chǎn)品規(guī)格：20次|50次

本試劑盒適用于快速提取植物組織細胞總RNA，是在無苯酚、氯fǎngRNA快速提取技術(shù)基礎(chǔ)上，又采用基因組DNA清除柱技術(shù)可以有效清除gDNA殘留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實驗。獨特的裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶，植物RNA助提劑幫助結(jié)合多糖多酚并通過離心去除，然后裂解混合物用乙醇調(diào)節(jié)RNA結(jié)合吸附到基因組DNA清除柱，基因組DNA清除柱子同時吸附清除殘留的DNA, 然后RNA被選擇性洗脫濾過。濾過的RNA用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后，RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜， 再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟, 去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物，蛋白等雜質(zhì)去除， zuì后低鹽的RNase free H20將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。

本試劑盒特點：
1.完全不使用有毒的苯酚，氯fǎng等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
2.簡捷，單個樣品操作一般可在25分鐘內(nèi)完成，上zuì簡單快速的試劑盒。
3.獨特的植物RNA助提劑可以有效結(jié)合多糖多酚，提高清除效果。
4.獨特研發(fā)成功基因組DNA清除柱技術(shù)可以有效清除gDNA殘留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實驗。
5.適應(yīng)性其廣泛，可以提取包括棉花、松針、冬青樹葉、葡萄葉片、等100多種外試劑盒提取失敗的樣品。詳細樣品列表請參考公司主頁產(chǎn)品介紹。
6.多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達1.9～2.2，基本無DNA殘留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各種實驗。

試劑盒組份：

組份	20次	50次
裂解液RLT	20ml	50ml
裂解液CLB	8ml	8ml
裂解液RLT Plus	10ml	25ml
去蛋白液RW1	15ml	40ml
漂洗液RW	5ml	10ml
RNase-freeH2O	10ml	10ml
PLANTbalb	2ml	5ml
基因組DNA清除柱和收集管	20套	50套
吸附柱和收集管	20套	50套

注意事項：
1. 所有的離心步驟均可在室溫完成（4℃離心也可以），使用轉(zhuǎn)速可以達到13000rpm的傳統(tǒng)臺式離心機，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。
2. 需要自備乙醇，研缽(可選)。
3. 樣品處理量不要超過基因組清除柱DA和和RNA吸附柱處理能力，否則造成DNA殘留或產(chǎn)量降低。開始摸索實驗條件時，如果不清楚樣品DNA/RNA含量時可使用較少的樣品處理量，將來根據(jù)樣品試驗情況增加或者減少處理量。
4. 裂解液RLT和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作時戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5. 關(guān)于DNA 的微量殘留:
一般說來任何總RNA 提取試劑在提取過程中無法完全避免DNA 的微量殘留（DNase 消化也無法做到無殘留），本試劑盒RNA提取產(chǎn)品，由于采取了本公司獨特的緩沖體系和基因組DNA 清除柱技術(shù)，大多數(shù)DNA 已經(jīng)被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR 和熒光定量PCR。個別特殊情況如DNA 含量過于豐富造成殘留或者要進行嚴(yán)格的mRNA 表達量分析熒光定量PCR，我們建議在進行模板和引物的選擇時：
1) 選用跨內(nèi)含子的引物,以穿過mRNA中的連接區(qū),這樣DNA就不能作為模板參與擴增反應(yīng)。
2) 選擇基因組DNA和cDNA上擴增的產(chǎn)物大小不一樣的引物對。
3) 將RNA提取物用RNase-free的DNase I 處理。本試劑盒還可以用于DNase I處理后的RNA清潔，請聯(lián)系我們索取具體操作說明書。
4) 在步驟去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上進行DNase I柱上消化處理。購買DNA酶柱上消化試劑盒前可先索取具體操作說明書。
6. 仔細閱讀補充說明2，如果裂解液CLB效果好，可以聯(lián)系我們單獨訂購裂解液CLB，或者購買試劑盒的時候，指明將裂解液RLT換成裂解液CLB。

儲存條件：室溫，有效期6個月。

本制品別名：植物RNA抽提試劑盒|植物RNA純化試劑盒

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貨號	名稱	規(guī)格
BTN51102	細菌RNA提取試劑盒	100次
BTN130845	柱式分枝桿菌RNA提取試劑盒	50次
BTN80103	柱式細菌RNA提取試劑盒	50次
BTN3073	一管式病毒RNA提取試劑盒	100次
BTN130977	生物素化的Oligo(dT)	5μg
BTN60204	非酶多糖清除劑(RNA樣品專用)	10mL
ALH029	細菌RNA提取試劑盒(柱式吸附去除DNA)	20次|50次

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名稱：血液RNA柱式提取試劑盒
貨號：BTN71202
規(guī)格：50次
本試劑盒是在血液RNA提取試劑盒(BTN3071)基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式升級產(chǎn)品，專門從動物全血樣品中快速提取總RNA。

試劑盒特點：
1. 比BTN3071更加簡單快捷，直接使用新鮮的或冷凍的抗凝全血樣品，不需裂解紅細胞等任何預(yù)處理步驟，整個提取過程只需要十分鐘左右，可以全在室溫下進行。
2.產(chǎn)量和純度更高，OD260/280 均在2.0左右，產(chǎn)率一般為2-5μg/mL人血。
3. 每次微量提取的zuì大樣品處理量可以達到1.5mL，高于進口的同類產(chǎn)品。
4.與常用的抗凝劑(包括肝素，EDTA，檸檬酸鈉，草酸鈉)兼容，得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern雜交等研究。

試劑盒組成：

成分	50T
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脫液	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 將0.2-1.5mL 新鮮或解凍后的抗凝全血加入到1.5mL塑料離心管中。
2. 12000～15000g室溫離心3分鐘，棄上清(血漿)。如果此時血液細胞沉淀體積大于0.2mL，則需要減少血液的使用量，具體減少量需根據(jù)具體情況決定，因為各個個體(尤其是患者)血液中白細胞數(shù)目差別很大。
3. 將1mL溶液A加入到血液細胞沉淀中，用移液槍吹打沉淀使細胞裂解。
4. 將0.3mL的溶液B加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
5.和0.2mL 氯fǎng加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
6. 12000～15000g室溫離心3～5分鐘，將上清液(為無色或淺紅色，約0.5-0.9mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈離心管中。注意：轉(zhuǎn)移的液體不要超過0.7mL，否則下一步不能加入等體積的溶液C。為防止污染，zuì好留100μL左右的上清液。下層有機相一般呈深紅色，中間層為白色，含有DNA，蛋白質(zhì)和其他細胞破碎物，避免觸及或吸取。
7. 加入等體積的溶液C，充分顛倒混勻。
8. 分兩次將溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，每次轉(zhuǎn)移后12000～15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液，室溫離心半分鐘，棄穿透液。
10. 如果有必要，可以再加0.3mL 通用洗柱液，室溫離心半分鐘，棄穿透液。注意：增加此步可以進一步提高RNA的純度。
11.室溫12000～15000g離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的通用洗柱液會影響RNA的后續(xù)反應(yīng)。
12. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一個RNase-free的收集管中，加入50-100μL RNA洗脫液，室溫放置1-2分鐘。
13. 12000～15000g室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA 完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳，因為非變性膠不能分離所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
15. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定：將5-10μL RNA溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。人血RNA產(chǎn)率一般為2-5μg/mL。
16. RNA 純度測定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān))，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。

疑難解答：
Q：如何去除RNA樣品中的DNA污染？
A：可以使用百奧萊博的非酶DNA 清除劑DNA ERASOL-2。
Q：為何有的樣品在第6 步離心后有很厚的中間層，上清很少。
A：這是因為蛋白質(zhì)變性不充分，可以適當(dāng)減少血液的用量。白細胞多的血液容易產(chǎn)生這種情況。
Q：離心吸附柱的RNA zuì大吸附量是多少？
A：是40μg。


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