JN0086 DNA Ladder 2000

我公司致力于為客戶提供高純度、低成本的活性重組蛋白,包括DNA Ladder 2000 在內(nèi)的各類受體、細(xì)胞因子、生長因子、轉(zhuǎn)錄因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...
特別提示:包括DNA Ladder 2000 Plus在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:DNA Ladder 2000 Plus
產(chǎn)品貨號(hào):JN0086
產(chǎn)品規(guī)格:500μl(100次)
本DNA Marker為預(yù)混1×Loading Buffer的DNA溶液,可直接電泳。DNA Ladder 2000 Plus在DNA Ladder 2000基礎(chǔ)上增加了3000bp,4000bp,5000bp的條帶。
片段組成:
100bp,250bp,500bp,750bp(加亮),1000bp,2000bp,其中750bp條帶濃度加倍,約為20 ng/μl,顯示為亮帶,使電泳結(jié)果更容易辨認(rèn),亦可用于定量。其它各條帶濃度約為10 ng/μl。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年。
圖1:DNA Marker電泳圖

圖2:DNA Marker條帶示意圖

表1:DNA Marker選擇指南
目的條帶分子量范圍 (推薦瓊脂糖%) | 標(biāo)準(zhǔn)分辨率 | 高精分辨率 |
1500bp以下 (1.0%到2.0% Agrose) | 200bp DNA Ladder | 100bp DNA Ladder |
200bp DNA Ladder Plus | 100bp DNA Ladder Plus | |
100bp DNA Ladder ODD | DNA Ladder 2000 Plus | |
100bp DNA Ladder ODD Plus | DIY DNA Marker(條帶任選) | |
DNA Ladder 2000 | ||
1500bp以上 (0.7% Agrose) | DNA Ladder 3000 | 1kb DNA Ladder I |
DNA Ladder 5000 | 1kb DNA Ladder II | |
DNA Ladder 9000 | 1kb DNA Ladder Plus I | |
DNA Ladder 10000 | 1kb DNA Ladder Plus II | |
λ/Hind III DNA Marker | DIY DNA Marker(條帶任選) |
表2:DNA Marker系列一覽表
DNA Marker | 條帶組成(bp) | 瓊脂糖(%) |
100bp DNA Ladder | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000 | 1.5% |
100bp DNA Ladder Plus | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1200、1500、2000 | 1.0% |
100bp DNA Ladder ODD | 100、300、500、700、900、1100、1500 | 1.5% |
100bp DNA Ladder ODD Plus | 100、300、500、700、900、1100、1500、2000、3000 | 1.0% |
200bp DNA Ladder | 200、400、600、800、1000、1200、2000 | 1.5% |
200bp DNA Ladder Plus | 200、400、600、800、1000、1200、2000、3000、5000 | 1.0% |
DNA Ladder 2000 | 100、250、500、750、1000、2000 | 1.0% |
DNA Ladder 2000 Plus | 100、250、500、750、1000、2000、3000、4000、5000 | 1.0% |
DNA Ladder 3000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000 | 0.7% |
DNA Ladder 5000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000、5000 | 0.7% |
DNA Ladder 9000 | 500、1000、2000、3000、5000、9000 | 0.7% |
DNA Ladder 10000 | 500、1000、2000、4000、7000、10000 | 0.7% |
1kb DNA Ladder I | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
1kb DNA Ladder Plus I | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
1kb DNA Ladder II | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
1kb DNA Ladder Plus II | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
λ/Hind III DNA Marker | 125、564、2027、2322、4361、6557、9416、23130 | 0.6% |
DIY DNA Marker(條帶任選) | 100、200、250、300、400、500、600、700、750、800、900、1000、1100、1200、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000等24個(gè)fregment任選 | 詳情請參考說明書 |
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名稱:超快核酸電泳液(干粉)
貨號(hào):BTN51210
規(guī)格:50L
SuperBuffer-2是我司在SuperBuffer基礎(chǔ)上開發(fā)的DNA/RNA 兩用快速電泳液。它跟SuperBuffer一樣,能以高達(dá)30 V/cm的電壓電泳,達(dá)到快速電泳的目的。跟SuperBuffer 不同的是,本產(chǎn)品對鹽離子濃度敏感度低,同時(shí)還能用于RNA電泳。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.快速,電泳時(shí)間短,對分辨率要求不高的電泳(如PCR和酶切檢測等)甚至可以在5-10分鐘內(nèi)完成。
2. 不影響后續(xù)的Southern雜交,DNA膠回收和DNA連接等反應(yīng)。
3. 價(jià)格與TBE(干粉)相當(dāng)甚至更。
4. DNA膠回收率高于使用TAE和TBE電泳的膠回收。
儲(chǔ)存條件:常溫保存和運(yùn)輸,有效期兩年。
使用方法:
一:溶液的配制
將本產(chǎn)品全部加到一個(gè)干凈的容量適當(dāng)?shù)娜萜髦?,按下表的用量加入蒸餾水并在室溫下用磁力攪拌器攪拌,直到干粉完全溶解(一般需要30分鐘左右)。
配法一(配制20X濃縮液):加2.5升得到20×工作液
配法二(直接配制工作液):加水50升得到50×工作液
注:其他濃度的濃縮液配制可以按比例計(jì)算,但濃縮液濃度不能超過20×,否則干粉不能全部溶解。由于干粉含多種未徹底混合均勻的成份,所以必須一次性全部用于溶液的配制。如果緩沖液(濃縮液或工作液)長時(shí)間不用,zuì好滅菌后放4℃長期保存。
二:DNA電泳
將SuperBuffer-2濃縮液用蒸餾水稀釋到1×,除了需要使用較高電壓才能得到快速的電泳結(jié)果外,操作跟使用TAE和TBE基本一樣。需注意的地方是:
1.電壓:在SuperBuffer-2溶液中既可以使用常規(guī)電壓,也可以使用較高電壓,只是使用常規(guī)電壓時(shí),其快速的優(yōu)越性就體現(xiàn)不出來。使用較高電壓時(shí),由于各電泳槽結(jié)構(gòu)不同,zuì佳電壓需要稍做摸索。次zuì好將工作電壓調(diào)到zuì高電壓的80%左右,即平均25 V/cm(電距離)。對一般minigel,一般可以用250-350V 跑5-10分鐘;對大的電泳槽,可用400-450V 跑5-10分鐘。每次根據(jù)電泳結(jié)果和緩沖液溫度決定各電泳槽的zuì佳工作電壓和時(shí)間。一般電壓越高,電泳時(shí)間越短。若在電泳時(shí)發(fā)生電流或電壓逐漸下降的現(xiàn)象,請檢查電泳儀是否設(shè)置了電流上限或功率上限。緩沖液電泳次數(shù)超過3次或緩沖液中有細(xì)菌/真菌生長也會(huì)出現(xiàn)此現(xiàn)象,需要更換新的緩沖液。
2.膠濃度:建議將瓊脂糖凝膠的濃度控制在0.8%左右,對于長度在100bp以下的DNA片段,可以將瓊脂糖凝膠的濃度提高到1.2%左右。由于每次溶膠過程中會(huì)丟失水份,所以zuì好在溶膠后適當(dāng)補(bǔ)充水份(可以前后稱重),否則膠濃度會(huì)逐漸增加,DNA的移動(dòng)速度會(huì)減低、產(chǎn)熱會(huì)增加。使用0.8%左右的瓊脂糖凝膠的好處是一方面可以節(jié)約膠的用量,另一方面可以使DNA的泳動(dòng)速度更快,同時(shí)還能夠提高DNA的回收率。
3.染色:如果使用EB,zuì好把染料加入到融化后的凝膠中(只是EB的終濃度zuì好為0.4 -0.5μg/mL,比使用TAE和TBE時(shí)稍高),但也可以加入到電泳緩沖液中或/和電泳上樣液中。如果使用百奧萊博低毒染料綠如藍(lán),zuì好將染料加入到融化后的凝膠中。如果只有膠中有染料,則長時(shí)間電泳后(超過20分鐘),大部分染料在高壓下會(huì)與DNA 分離,DNA 條帶可能會(huì)看不見或看起來很淡,此時(shí)應(yīng)該再染色一次。在染色液中加入一定的量的NaCl(終濃度≥0.05 mol/L)能提高染色效果。SuperBuffer-2與SYBR Green I 也有良好的兼容性,可以結(jié)合使用。
4. DNA 條帶扭曲:DNA樣品中所含SDS 量過高時(shí)(SDS 主要來于上樣液),DNA條帶將出現(xiàn)扭曲,影響實(shí)驗(yàn)效果。建議使用不含SDS的上樣液。
5. 反復(fù)使用:1×SuperBuffer-2電泳液至少可以重復(fù)使用2-3次,如果使用大電泳槽,可以重復(fù)使用的次數(shù)會(huì)更多。
6. TAE和TBE膠:已經(jīng)用TAE和TBE電泳液配置好的瓊脂糖凝膠可以直接放入1× SuperBuffer-2電泳液中按上述電泳條件電泳,但有時(shí)候會(huì)有扭曲現(xiàn)象。
三:RNA電泳
跟DNA電泳一樣,必須在使用前用水將SuperBuffer-2溶液稀釋到1×,其使用方法跟DNA電泳的主要區(qū)別是:
1.電壓:RNA電泳時(shí),zuì高使用電壓大約只有DNA zuì高使用電壓的一半左右,所以一般minigel可以使用150 V左右的電壓。由于各實(shí)驗(yàn)室電泳槽規(guī)格各異,次電泳時(shí),zuì好將工作電壓調(diào)到跟MOPS電泳一樣的電壓,每次再逐漸往上調(diào)電壓和時(shí)間,根據(jù)電泳結(jié)果和測定緩沖液的溫度決定今后的工作電壓。
2. RNA上樣液:RNA必須與含變性劑的RNA上樣液混合,并在80℃保溫10分鐘后冰浴2-5分鐘再上樣。不能直接將RNA樣品上樣或使用DNA上樣液,否則電泳不但很難得到清晰的條帶,并且在加樣孔中還會(huì)有看似DNA污染的條帶出現(xiàn)。推薦使用百奧萊博生產(chǎn)的RNA變性/上樣/染色三合一即用型溶液RNAload。
3.膠濃度:RNA電泳zuì好使用1%-1.5%的瓊脂糖凝膠,用1X SuperBuffer-2配制。
4.染色:同DNA電泳。
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