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產(chǎn)品詳情

WE0192 超純RNA提取試劑盒

  • 產(chǎn)品/服務(wù):WE0192 超純RNA提取試劑盒
  • 型 號:WE0192
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-06-05
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):922
產(chǎn)品簡介

超純RNA提取試劑盒由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供,僅用于生物化學(xué)研究方面,我公司專注于RNA提取純化產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng),為您提供的超純RNA提取試劑盒質(zhì)量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...

產(chǎn)品詳細介紹

特別提示:包括超純RNA提取試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:超純RNA提取試劑盒
英文名稱:SuperPure RNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號:WE0192
產(chǎn)品規(guī)格:50次|200次

  本試劑盒是基于TRIzon改進后的柱式總RNA提取試劑盒,裂解液充分裂解并勻質(zhì)化樣本,采用獨特的硅基質(zhì)膜吸附技術(shù),通過離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下專一的結(jié)合溶液中的RNA,同時zuì大限度的有效除去蛋白質(zhì)、無機鹽離子及有機雜質(zhì)等;可從動物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細胞等樣品中快速提取總RNA,每次可處理 30-50 mg組織或5×106細胞,可同時處理多個不同樣品。本試劑盒提取得到的RNA可直接應(yīng)用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、體外翻譯等實驗。

試劑盒組成

組份 50次
TRIzon Reagent 60ml
Buffer RW1 40ml
Buffer RW2(濃縮液) 11ml
RNase-Free Water 10ml
吸附柱RM及收集管 50套
RNase-Free離心管(1.5ml) 50個

保存條件:TRIzon Reagent 2~8℃避光保存,其他組分室溫(15~30℃)。

自備試劑:lǜ仿(新開封或提取RNA專用)、70%乙醇(無RNase水配制)、無水乙醇。

產(chǎn)品特點
1、純度高:zuì大限度除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì),提取的RNA可直接用于下游各種實驗。
2、提取量大:獨特的裂解液配方,充分裂解細胞或組織,RNA提取量多至100μg。
3、快速:步驟少,操作簡單,節(jié)省時間。
4、兼容性強:適用于多種動植物組織和細胞RNA的提取。

實驗前準備及重要注意事項
1、預(yù)防RNase污染,應(yīng)注意以下幾方面:
1)使用無RNase的塑料制品和槍頭,避免交叉污染。
2)玻璃器皿應(yīng)在使用前于180℃高溫下干烤4小時,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分鐘,用水徹底沖洗后高壓滅菌。
3)配制溶液應(yīng)使用無RNase的水。
4)操作人員戴一次性口罩和手套,實驗過程中要勤換手套。
2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則影響RNA提取得率和質(zhì)量。
3、使用前若發(fā)現(xiàn)TRIzon Reagent有沉淀,可置于56℃水浴幾分鐘,即可溶解。
4、次使用前應(yīng)按照試劑瓶標簽說明在Buffer RW2中加入無水乙醇。
5、所有離心步驟若無特殊說明均在室溫下進行,且所有操作步驟動作要迅速。
6、若下游實驗對DNA非常敏感,建議用不含RNase的DNase I(貨號:WE0213S)對RNA進行處理。

操作步驟
1、樣品處理
①植物組織:取新鮮植物組織在液氮中充分研磨或?qū)⒅参锝M織剪碎后直接在TRIzon Reagent中迅速研磨,每30-50 mg組織加入1ml TRIzon Reagent,混勻。
注意:樣品體積一般不要超過TRIzon Reagent體積的10%。
②動物組織:取新鮮或-70℃凍存的動物組織盡量剪碎,每30-50 mg組織加入1ml TRIzon Reagent,勻漿儀進行勻漿處理?;蛟谝旱醒心ズ蠹尤隩RIzon Reagent 1ml混勻。
注意:樣品體積一般不要超過TRIzon Reagent體積的10%。
③單層培養(yǎng)細胞:吸去培養(yǎng)液,可直接在培養(yǎng)板中加入適量TRIzon Reagent(每10cm2 面積需要1ml TRIzon Reagent),用取樣器反復(fù)吹打使細胞裂解。也可用胰蛋白酶處理后,將細胞溶液轉(zhuǎn)移至RNase-Free的離心管中,300×g離心5 min,收集細胞沉淀,仔細吸除所有上清,加入TRIzon Reagent 1ml混勻。
注意:
1)收集細胞數(shù)量不要超過1×107。
2)TRIzon Reagent加量根據(jù)培養(yǎng)板面積決定,不是由細胞數(shù)決定。如果TRIzon Reagent加量不足,可能導(dǎo)致提取的RNA中有DNA污染。
3)收集細胞時一定要將細胞培養(yǎng)液去除干凈,否則會導(dǎo)致裂解不完全,造成RNA的產(chǎn)量降低。
④細胞懸液:離心收集細胞。每5×106-1×107動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加入1ml TRIzon Reagent。
注意:
1)加入TRIzon Reagent前不要洗滌細胞,以免RNA降解。
2)一些酵母和細菌細胞可能需要勻漿儀或液氮研磨處理。
⑤血液處理:直接取新鮮的血液,加入3倍體積的TRIzon Reagent(推薦0.25ml全血加入0.75ml TRIzon Reagent),充分振蕩混勻。
⑥可選步驟:對于蛋白、脂肪、多糖或胞外物質(zhì)含量高的樣品,如肌肉組織、脂肪組織或植物的塊莖,可以在勻漿處理后4℃,12000rpm(~~13400×g)離心10分鐘以除去不溶物質(zhì),此時沉淀中含胞外物質(zhì)、多糖和高分子量的DNA,而RNA存在于上清中。

2、樣品中加入TRIzon Reagent后反復(fù)吹打幾次,使樣本充分裂解。室溫放置5分鐘,使蛋白核酸復(fù)合物完全分離。
3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μllǜ仿的比例加入lǜ仿,蓋好管蓋,劇烈振蕩15秒,室溫放置2分鐘。
4、4℃ 12000rpm(~~13400×g)離心10分鐘,此時樣品分為三層:紅色有機相,中間層和上層無色水相,RNA主要在上層水相中,將上層水相移到一個新的RNase-Free離心管(自備)中。
5、在得到的水相溶液中加入等體積的70%乙醇(無RNase水配制),顛倒混勻。
6、將上步所得溶液全部加入到已裝入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液,可分多次轉(zhuǎn)入。12000rpm離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入700μl Buffer RW1,12000rpm離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
9、重復(fù)步驟8。
10、12000rpm離心2 分鐘,倒掉收集管中廢液。將吸附柱置于室溫數(shù)分鐘,徹底晾干。
注意:這一步目的是將吸附柱中殘余乙醇去除,乙醇殘留會影響后續(xù)酶促反應(yīng)(酶切、PCR等)。
11、將吸附柱置于一個新的無RNase離心管中,向吸附柱的中間部位加入30-50μl RNase-Free Water,室溫放置1分鐘,12000rpm離心1分鐘,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
1)RNase-Free Wate體積不應(yīng)小于30μl,體積過小影響回收率。
2)如果要提高RNA的產(chǎn)量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重復(fù)步驟11。
3)如果要提高RNA濃度,可將得到的溶液重新加入到吸附柱中,重復(fù)步驟11。

儲存條件:室溫(15~30℃)。

根據(jù)您的關(guān)注的超純RNA提取試劑盒,您可能還對以下產(chǎn)品有需求:

貨號 名稱 規(guī)格
BTN110810 病毒沉淀劑 100mL
BTN101118 水樣病毒沉淀劑 10次
BTN81220 昆蟲RNA柱式提取試劑盒 50次
BTN130977 生物素化的Oligo(dT) 5μg
BTN90903 無RNase的DNase溶液 500U
WE0193 超純RNA提取試劑盒(DNase I) 50次
WE0203 DNA/RNA提取試劑盒 50次


關(guān)注超純RNA提取試劑盒,的同時,為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品:



名稱:非凍型組織RNA保存液
貨號:BTN3060
規(guī)格:250mL
本RNA保存液是一種在較高溫度下保存RNA樣品的非凍型溶液,它能迅速滲入細胞內(nèi),通過抑制 RNase的活性而保存RNA的完整性。

產(chǎn)品特點:
1. 操作簡單,將組織剪薄浸沒在RNA保存液中即可使其RNA不被降解。
2. 替代液氮,使樣品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規(guī)模采集。
3. RNA完整,因本產(chǎn)品能迅速抑制組織中RNA酶的活性,故從中提取的RNA的質(zhì)量跟液氮保存的樣品相比不相上下。
4. 方便運輸,處理過的樣品能在 25℃保存一周,使樣品郵寄和運輸變得容易和,有利學(xué)術(shù)合作和交流。
5. 反復(fù)凍融,經(jīng)本產(chǎn)品處理的樣品可反復(fù)凍融20次,其間可對樣品進行各種處理而不影響zuì終提取的RNA的質(zhì)量。
6. 結(jié)果準確,本產(chǎn)品進入細胞十分快速,基因表達在發(fā)生應(yīng)急改變前就得以鎖定,故RNA分析更能反映取樣時的真實情況。
7.可比性強,本產(chǎn)品能減少大規(guī)模樣品處理中的誤差,增加各次實驗數(shù)據(jù)間的可比性,對大規(guī)?;虮磉_譜的分析尤其有用。
8. 兼容性廣,雖然處理過的樣品可以使用動物RNA提取試劑盒和TRIzol等試劑提取其RNA,樣品還可直接用于組織切片,免疫學(xué)和流式細胞分析而不影響RNA提取的質(zhì)量。

儲存條件:常溫運輸及保存,有效期二年。

使用方法:

一:用本產(chǎn)品保存新鮮組織樣品
1. 估計完全浸沒樣品所需要本產(chǎn)品的體積(1g組織需10mL)。
2. 標記收集管并加入估計所需量的本產(chǎn)品。
3.以zuì快速度將樣品剪切成厚度小于0.5cm的碎塊。
注: 鼠肝、腎和脾等小器官樣品和沒有蠟質(zhì)保護層的植物樣品可不需剪切而直接放入本產(chǎn)品中保存,有蠟質(zhì)保護層的植物樣品需要先將蠟表皮破壞。
4. 將組織碎塊完全浸沒于收集管的本產(chǎn)品中。
5. 將收集管存放于溫度適當?shù)牡胤?,存放時間不能超過該溫度下的zuì長存放時間,如果要存放在-20℃或-80℃,需先將樣品在 4℃放置過夜后再轉(zhuǎn)移到zuì后的溫度。注:將樣品轉(zhuǎn)移到-20℃或-80℃前,需要倒棄保護液。常見存放溫度與其zuì長存放時間關(guān)系為如下:
保存溫度 時間及效果
37℃ 一天(保存三天的樣品 RNA有部分降解)
18-25℃ 一周(保存兩周的樣品 RNA有輕微降解)
2-8℃ 一個月
-20℃和-80℃ 長期

6.從存放處取出樣品(-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化),用消過毒的鑷子將組織碎塊從保護液中取出。
7. 立即開始RNA提取或進行其他處理(如將樣品分割成更小的碎塊再重新保存等)。注:樣品可以反復(fù)凍融二十次而其 RNA 質(zhì)量不會受到影響。

二:本產(chǎn)品保存培養(yǎng)細胞、懸浮細胞、細菌和RNA 病毒
1. 標記收集管。
2. 將待樣品轉(zhuǎn)移到離心管中,離心收集細胞,棄上清。注:處理含病毒的樣品(如血漿)可直接從步驟第4 步開始。
3. 用冰浴的緩沖液洗一次。
4. 將細胞懸浮在少量緩沖液中。
5. 加入五到十倍體積的本產(chǎn)品,混均; 對病毒樣品,加入兩到三倍體積的本產(chǎn)品,混均。
6. 將收集管存放于溫度適當?shù)牡胤?,存放時間不能超該溫度下的zuì長存放時間。
如果要存放在-20℃或-80℃,需先在4℃放置過夜后再轉(zhuǎn)移到zuì后溫度條件(將樣品轉(zhuǎn)移到-20℃或-80℃前,需要倒棄保護液)。注:樣品存放溫度與其zuì長存放時間關(guān)系為如下:
保存溫度 時間及效果
37℃ 一天(保存三天的樣品 RNA 有部分降解)
18-25℃ 一周(保存兩周的樣品 RNA 有輕微降解)
2-8℃ 一個月
-20℃和-80℃ 長期

7. 取出樣品,室溫下融化(-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化)。
8. 加入一倍體積的預(yù)冷的緩沖液(如PBS),用常規(guī)離心法收集細胞并用緩沖液洗一次。病毒樣品可免去此步驟。
9.細胞直接用于RNA的提取或其他處理。

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