北京百奧萊博供應(yīng)的通用引物 27F用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，我公司的通用引物 27F品質(zhì)上佳，經(jīng)過(guò)多年的開(kāi)發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶(hù)訂購(gòu)。...

特別提示：包括通用引物 27F在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱(chēng)：通用引物 27F
英文名稱(chēng)：Universal primers 27F
產(chǎn)品貨號(hào)：QN0958
產(chǎn)品規(guī)格：250μl(10uM)|1ml

儲(chǔ)存條件：-20℃

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BTN130506 PCR級(jí)海藻糖溶液 1.5mL
BTN90805 即用型PCR試劑盒(含染料) 1ml×10|5mL×20
BTN131083 Ribo-SPIA cDNA擴(kuò)增試劑盒 20次
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WE0111 BaldStar Taq DNA Polymerase 500U|2500U
WE0114 2×BaHF MasterMix(含染料) 5ml

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名稱(chēng)：miRNA熒光定量RT-PCR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：BTN131042
規(guī)格：25次
本試劑盒采用SYBR Green I 嵌合熒光染料法的原理來(lái)進(jìn)行miRNA熒光定量PCR檢測(cè)。本產(chǎn)品是專(zhuān)門(mén)為miRNA定量檢測(cè)而研發(fā)的新一代預(yù)混形式的熒光定量PCR檢測(cè)試劑。2×miRNA qPCR Mix包含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR增強(qiáng)劑等所有PCR所需要的成分。miRNA qPCR Mix中所含的熒光染料SYBR Green I可以與所有的雙鏈DNA結(jié)合，使該產(chǎn)品可用于不同靶序列的檢測(cè)而不需合成特異性標(biāo)記探針。其中的Taq DNA polymerase是經(jīng)化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)酶，配合獨(dú)特的緩沖體系，使反應(yīng)特異性更好，靈敏度更高，并能在更廣的范圍內(nèi)對(duì)miRNA進(jìn)行準(zhǔn)確定量。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 簡(jiǎn)便、快捷完成miRNA的檢測(cè)。
2. 檢測(cè)通量高，只需zuì少的RNA樣本，即可同時(shí)進(jìn)行多種目標(biāo)miRNA的檢測(cè)。
3. 檢測(cè)特異性好，獨(dú)特的miRNA引物設(shè)計(jì)技術(shù)及其優(yōu)化的反應(yīng)體系避免了非特異性擴(kuò)增、特別是Pre-miRNA的污染。
4. 檢測(cè)分辨率高：該系統(tǒng)能分辨單堿基差異的miRNA。
5. 檢測(cè)靈敏度高：可在低至pg級(jí)的總RNA中檢測(cè)到特異表達(dá)的miRNA。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
2×miRNA qPCR Mix	0.75ml
Reverse Primer(10μm)	30μl
RNase-Free Water	1ml
miRNA cDNA鏈合成試劑盒	25T
說(shuō)明書(shū)	1份

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、miRNA cDNA鏈合成
請(qǐng)參見(jiàn)miRNA cDNA 鏈合成試劑盒產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)。

二、miRNA熒光定量檢測(cè)
1.室溫融化2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer(10μm)。
2. 使用時(shí)請(qǐng)將2×miRNA qPCR Mix上下顛倒輕輕均勻混合，避免起泡，并經(jīng)短暫離心后使用。如果試劑沒(méi)有混勻，其反應(yīng)性能會(huì)有所下降。
3. 按照下表組分配制熒光定量PCR反應(yīng)體系：

試劑組份	體積
2×miRNA qPCR Mix	25μl
Forward Primer(自備)	1μl
Reverse Primer	1μl
miRNA 鏈cDNA	xμl
RNase-Free Water	至50μl

4. 建議反應(yīng)程序設(shè)置如下：

循環(huán)	溫度	時(shí)間
1×	95℃	10min
40～45×	95℃	15s
	60℃	1min
溶解曲線分析	根據(jù)PCR儀要求設(shè)定

注意事項(xiàng)：
1. miRNA 鏈cDNA的加入量不要超過(guò)Real time PCR 體積10%。
2. 對(duì)于特殊的檢測(cè)體系，高含量的cDNA 模板易導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增，根據(jù)所檢測(cè)miRNA的豐度適當(dāng)?shù)南♂宑DNA(稀釋10倍或者100倍)。
3. 2×miRNA qPCR Mix中含有SYBR Green I和ROX染料，保存本產(chǎn)品或配制PCR反應(yīng)液時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光照射。

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