裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的克隆與表達(dá)產(chǎn)品，本制品僅用于生物化學(xué)研究方面，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價(jià)格，深為用戶稱道，了解更多裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒等克隆與表達(dá)產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒
英文名稱：S.pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BTN100103A
產(chǎn)品規(guī)格：20次

本裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑是一種通過化學(xué)處理，快速制備裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞，用于長(zhǎng)期凍存以備后續(xù)轉(zhuǎn)化的產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.一次制備，-80℃保存，多次使用，免去每次轉(zhuǎn)化都要制備裂殖酵母感受態(tài)細(xì)胞。
2. 操作簡(jiǎn)單，單溶液制備，除酵母培養(yǎng)的時(shí)間外，整個(gè)操作只需要30分鐘。
3. 主要用于裂殖酵母S. pombe ，其他多種實(shí)驗(yàn)用酵母菌株zuì好選用酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑(BTN81109)。
4. 受體酵母可以不含質(zhì)粒，也可用于攜帶有選擇性質(zhì)粒的酵母(如雙雜交體系中的酵母)。
5. zuì高轉(zhuǎn)化效率可達(dá)到0.2-1×105個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA。
6. 得到的感受態(tài)細(xì)胞可以用各種線性或環(huán)狀酵母穿梭質(zhì)粒DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
7.可以用于酵母雙雜交、定點(diǎn)突變、基因破壞、等位突變基因修復(fù)等實(shí)驗(yàn)。
8. 本產(chǎn)品可以制備20只裂殖酵母感受態(tài)細(xì)胞(需要100mL裂殖酵母培養(yǎng)液)，其中A型只用于制備感受態(tài)細(xì)胞，B型還帶轉(zhuǎn)化液。

試劑盒組成：

組分	BTN100103A	BTN100103B
溶液A	1ml	1ml
裂殖酵母轉(zhuǎn)化液	-	一套(20次)
使用說明書	1份	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。

使用效果：
將一個(gè)酵母菌落接種到SLD培養(yǎng)基中，30℃搖晃培養(yǎng)直到OD600達(dá)到0.6-1.0，冰浴15分鐘后離心棄上清，用自備無菌水洗滌三次，然后用相當(dāng)于菌液zuì初體積百分之一的溶液A重懸，按每管50μl分裝，放-80℃保存。

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN130806	pression/BTN130806.html" target="_blank">胚胎裂解液	1mL
BTN120513	pression/BTN120513.html" target="_blank">即用型藍(lán)白T載體C型(T7-T3，無MCS)	20次
BTN90505	pression/BTN90505.html" target="_blank">大腸桿菌BL21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞	0.1mL*10
BTN121004	pression/BTN121004.html" target="_blank">大腸桿菌Rosetta(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞	0.1mL*10
BTN160688	pression/BTN160688.html" target="_blank">大腸桿菌TKB1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞	0.1mL*10
BTN80909	pression/BTN80909.html" target="_blank">IPTG溶液	1.5mL

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名稱：大腸桿菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)：BTN140378
規(guī)格：10*100μl
本產(chǎn)品來源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，從而減少對(duì)重組蛋白的降解，補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的4 種稀有密碼子(AGA、AUA、CCC、CUA)對(duì)應(yīng)的tRNA(argU、ileY、proL、leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系統(tǒng)中的表達(dá)水平。該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3 區(qū)(DE3 區(qū)含有T7 噬菌體RNA聚合酶)，可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)，同時(shí)具有四環(huán)素，氯霉素，鏈霉素，壯觀霉素抗性。本產(chǎn)品由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率高達(dá)108cfu/μg。
菌株基因型為：F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。

儲(chǔ)存條件：干冰運(yùn)輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養(yǎng)基等

使用方法：
1. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。
以下實(shí)驗(yàn)以100μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊90秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個(gè)離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含有相應(yīng)抗生素的LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。

注意事項(xiàng)：
1、涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計(jì)的克隆數(shù)較少，可通過離心(4,000rpm ，2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2、新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
4. 誘導(dǎo)時(shí)，IPTG濃度可選(0.1-2mM 均可)。
5. 為獲得需要量的蛋白，zuì佳誘導(dǎo)時(shí)間，溫度，IPTG濃度需實(shí)驗(yàn)者優(yōu)化。

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