SY0554 細(xì)胞膜可滲透鈣離子熒光探針

細(xì)胞膜可滲透鈣離子熒光探針由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持,本品用于科研試驗(yàn),本品質(zhì)量穩(wěn)定,價(jià)位合理,需要細(xì)胞膜可滲透鈣離子熒光探針等探針標(biāo)記及檢測(cè)產(chǎn)品的客戶(hù),請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
特別提示:包括細(xì)胞膜可滲透鈣離子熒光探針在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱(chēng):細(xì)胞膜可滲透鈣離子熒光探針
英文名稱(chēng):Fluo-4, AM, Cell Permeant
產(chǎn)品貨號(hào):SY0554
產(chǎn)品規(guī)格:50μg|5×50μg|1mg
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常使用Fluo-3, AM作為一種熒光探針來(lái)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化。其檢測(cè)原理基于Fluo-3,AM可穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,之后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3游離配體幾乎是非熒光性的,其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。但是,當(dāng)它與細(xì)胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光,熒光會(huì)增加60至80倍。
Fluo-4, AM是鈣指示劑Fluo-3,AM的升級(jí)版本,主要變化為后者分子上的兩個(gè)氯原子被Fluo-4,AM上的氟所取代,該結(jié)構(gòu)上的微小變化使Fluo-4,AM加載更快,在相同濃度下檢測(cè)信號(hào)更強(qiáng)。
本產(chǎn)品為Fluo-4,AM粉末狀,用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)時(shí),F(xiàn)luo-4, AM的常用濃度為0.5-5μM。
CAS:273221-67-3
分子式:C51H50F2N2O23
分子量:1096.95
Ex/Em(nm):Ex/Em=494nm/516nm
純度:≥98%
外觀:粉末
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥,有效期至少6個(gè)月。
結(jié)構(gòu)式

注意事項(xiàng)
1)熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
2)本Fluo-4,AM 容易吸潮,從冰箱取出后,請(qǐng)確認(rèn)在干燥的環(huán)境放至室溫后再開(kāi)封。由于試劑其微量,開(kāi)封前請(qǐng)將其短暫離心,以保證粉末落入管底。
3)次使用時(shí),建議母液即配即用。試劑溶解后盡可能在短時(shí)間內(nèi)使用,以保證實(shí)驗(yàn)效果。
4)母液遇水易分解,如果不能一次用完,建議分裝保存,例如分裝成5μl/管,用封口膜封口,并用鋁箔紙包裹,放在一個(gè)密閉性能好的塑料袋中,并放入一包干燥劑,在≤-20℃密封避光保存。
5)建議您在正式實(shí)驗(yàn)前先摸索一下細(xì)胞量、鈣離子熒光探針的終濃度、培養(yǎng)時(shí)間等,找到zuì佳實(shí)驗(yàn)條件。
6)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
根據(jù)您的關(guān)注的細(xì)胞膜可滲透鈣離子熒光探針(273221-67-3),您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:
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YT357 細(xì)胞內(nèi)pH熒光探針(BCECF AM) 50微升
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關(guān)注細(xì)胞膜可滲透鈣離子熒光探針(273221-67-3),的同時(shí),為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品:
名稱(chēng):Sephadex G50介質(zhì)
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規(guī)格:10mL
名稱(chēng):TdT加尾法DNA生物素標(biāo)記試劑盒
貨號(hào):BTN90605B
規(guī)格:5次
本試劑盒是基于TdT末端轉(zhuǎn)移酶能夠在DNA的3′端添加dNTP尾巴的原理而設(shè)計(jì),該反應(yīng)的示意圖如下:

產(chǎn)品特點(diǎn):
1.快速,15分鐘即可完成標(biāo)記反應(yīng)。
2. 不但可用于單鏈DNA和DNA Oligo標(biāo)記,還可用于3′突出的雙鏈DNA標(biāo)記,但后者標(biāo)記效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和dì高辛標(biāo)記的核苷酸等)。
4. 提供不帶標(biāo)記核苷酸、帶生物素標(biāo)記核苷酸和帶dì高辛標(biāo)記核苷酸三種選擇。
5. 同時(shí)提供非標(biāo)記的dATP,用戶(hù)可以用其調(diào)節(jié)加尾長(zhǎng)短和標(biāo)記核苷酸摻入比例。
6. 標(biāo)記的探針可用于電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)、原位雜交(ISH)、Northern Blot(不推薦用于低豐度RNA檢測(cè))、小RNA Northern、Southern Blot(不推薦用于單拷貝基因檢測(cè))、菌落雜交、斑點(diǎn)印跡雜交分析等。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
TdT緩沖液,5× | 20μl |
TdT(末端轉(zhuǎn)移酶,10U/μL) | 10μl |
dATP,2mM | 5μl |
標(biāo)記核苷酸 | (A、B、C不同,見(jiàn)注) |
超純水 | 1ml |
說(shuō)明書(shū) | 1份 |
注:A型用于自選標(biāo)記,用戶(hù)需自備標(biāo)記核苷酸,本產(chǎn)品不提供標(biāo)記核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.2mL微量離心管中按下表設(shè)置一個(gè)20μl體系的標(biāo)記反應(yīng)(如果需要標(biāo)記更多探針,請(qǐng)?jiān)黾訕?biāo)記體積而不要增加探針DNA的濃度):
成份 | 用量 |
探針DNA | 100-200 pmol |
TdT Buffer,5× | 4μl |
標(biāo)記核苷酸,1mM (A型需自備標(biāo)記核苷酸) | 1μl |
dATP,2mM | (見(jiàn)下注) |
TdT末端轉(zhuǎn)移酶(10U/μL) | 2μl |
超純水 | 補(bǔ)到20μl |
注:dATP可以不加,但這樣得到的加尾全部是標(biāo)記核苷酸,由于空間阻礙,靈敏度不一定zuì佳。如果雜交效果不好,摻入一定比例的dATP到標(biāo)記核苷酸中,以控制標(biāo)記的密度,提高比活。具體比例如何可以自己優(yōu)化。
2. 37℃反應(yīng)15分鐘,延長(zhǎng)到30分鐘也可以。如果沒(méi)有非標(biāo)記核苷酸存在,一般可以加尾3-5個(gè)Biotin或DIG標(biāo)記的核苷酸(標(biāo)記物空間阻礙抑制延長(zhǎng));如果有在加尾反應(yīng)中加入一定比例的非標(biāo)記核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本試劑盒只提供dATP而已),每條探針上可加上約100個(gè)核苷酸,平均含5個(gè)標(biāo)記核苷酸
3. 70℃ 10分鐘滅活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE電泳+銀染(相關(guān)試劑需要另購(gòu))檢測(cè)標(biāo)記效率,帶標(biāo)記的探針泳動(dòng)速度將低于沒(méi)標(biāo)記的探針。
5. 如果是非同位素標(biāo)記,探針不需純化可以直接用于雜交。如果需要純化非同位素標(biāo)記的探針,請(qǐng)不要酚/lǜ仿抽提,因?yàn)榉峭凰貥?biāo)記物一般會(huì)使探針DNA進(jìn)入有機(jī)相而丟失。
6. 使用時(shí)需將探針以1-8 ng/μL的終濃度加入到雜交液中(如果探針是雙鏈DNA,加入前還需熱變性)。如果不立即使用,非同位素標(biāo)記的探針DNA可-20℃長(zhǎng)期放置一年,同位素標(biāo)記的探針DNA不能放置。
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