CM-DiI活細胞染色劑由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研試驗，我公司專注于探針標(biāo)記及檢測產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的CM-DiI活細胞染色劑質(zhì)量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括CM-DiI活細胞染色劑在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：CM-DiI活細胞染色劑
產(chǎn)品貨號：SY0555
產(chǎn)品規(guī)格：50μg|2×50μg|5×50μg

CM-Dil為DiI的一種衍生物，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細胞，適合監(jiān)測細胞運動以及細胞定位分析。因具有良好的染料維持性，可用以追蹤多次傳代細胞的運動特性。其有著強而穩(wěn)定的紅色熒光（Ex/Em=553/570nm），與綠色熒光染料以及蛋白具有良好的熒光分辨性，適合做多重指標(biāo)染色。CM-Dil可自由穿透質(zhì)膜進入細胞，從而產(chǎn)生不具有膜滲透性的反應(yīng)產(chǎn)物。經(jīng)過幾次傳代此染料還可完好的維持在活細胞內(nèi)，染料隨著細胞分裂傳入子代細胞內(nèi)，但不會進入相鄰細胞。至少在72小時內(nèi)保持熒光信號（一般可傳3~6代）。工作濃度下，此染料無細胞毒性，不會影響細胞活力以及增殖能力。

與Dil相比，CM-Dil水溶性更好一些，便于懸浮細胞和固定細胞染色溶液的制備；CM-Dil攜帶的CM基團（即氯甲基替代基團）能與多肽及蛋白上的巰基反應(yīng)從而使該分子在醛類物質(zhì)中保持穩(wěn)定。與其他膜染料如DiI和PKH26不同，一些細胞經(jīng)CM-Dil染色后，可在后續(xù)的固定，透化和石蠟包埋處理中維持穩(wěn)定的標(biāo)記，因此特別適用于同時做細胞膜標(biāo)記以及后續(xù)的免疫組化，熒光原位雜交或者電鏡觀察的實驗。

研究證實，CM-DiI標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達穩(wěn)定，陽性標(biāo)記率達98%以上，標(biāo)記細胞形態(tài)良好，能有效地觀察細胞在體外的誘導(dǎo)分化情況；或?qū)?biāo)記的細胞注入體內(nèi)，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。

CAS：180854-97-1
分子式：C68H105Cl2N3O
分子量：1051.5
外觀：紅色固體
Ex/Em：553nm/570nm
推薦濾光器：XF23-Omega, 31002-Chroma
儲存條件：-20℃避光干燥，有效期12個月。
結(jié)構(gòu)式


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名稱：隨機引物法DNA探針標(biāo)記試劑盒
貨號：BTN90603A
規(guī)格：5次
本試劑盒是基于Feinberg和Vogelstein發(fā)明的隨機引物標(biāo)記法而開發(fā)出來的即用型DNA探針標(biāo)記試劑盒，標(biāo)記過程由雙鏈DNA熱變性、隨機引物與單鏈DNA結(jié)合、在Klenow DNA聚合酶催化下，引物的延伸合成DNA探針并摻入標(biāo)記的核苷酸三步組成，可用下面的示意圖表示：

本產(chǎn)品對Feinberg和Vogelstein經(jīng)典方法進行了改良。

產(chǎn)品特點：
1. 提供的標(biāo)記反應(yīng)液整合了除酶和模板外的所有成分，簡化了反應(yīng)加樣步驟，提高了標(biāo)記反應(yīng)的可重復(fù)性。
2. 使用無外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶，已標(biāo)記DNA探針不會被酶降解。
3.快速，zuì快1小時即可完成標(biāo)記反應(yīng)。
4. 得到的DNA探針比活性高(如果是同位素，可以達到109cpm/μg DNA)，檢測靈敏度高。
5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可)，DNA可以是各種形狀(線狀和環(huán)狀)的、也可以是單鏈或雙鏈的，長度在100bp以上均可。
6. 得到的探針長度在200-400nt之間，可以用于Southern雜交、Northern雜交、原位雜交、菌落和斑點印跡雜交等。
7. 提供三種標(biāo)記選擇，其中BTN90603A可用于各種同位素標(biāo)記和其他任何非同位素標(biāo)記，但需自備標(biāo)記底物；BTN90603B和BTN90603C可分別用于生物素和地高xīn標(biāo)記，不需自備標(biāo)記底物。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
2×A型標(biāo)記反應(yīng)液(自備標(biāo)記物型)	50μl(僅A型有)
2×B型標(biāo)記反應(yīng)液(生物素型)	50μl(僅B型有)
2×C型標(biāo)記反應(yīng)液(DIG型)	50μl(僅C型有)
dATP,2mM	10μL(僅A型有)
dTTP,2mM	10μL(僅A型有)
dGTP,2mM	10μL(僅A型有)
dCTP,2mM	10μL(僅A型有)
Klenow exo-聚合酶(2U/μL)	5μl
超純水	1ml
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在一干凈的硅化的塑料離心管中加入下列成分：

成分	用量
模板DNA	50-150ng
2×標(biāo)記反應(yīng)液(ABC三種之一)	10μl
超純水	補水到15μl

注意：非同位素標(biāo)記物由于疏水性強，容易與常用的塑料離心管表面非特異性結(jié)合，所以一定要使用硅化的塑料離心管。模板DNA并非越多越好，因為模板會在雜交反應(yīng)中跟標(biāo)記的探針雜交，競爭性地抑制探針跟靶分子的雜交。
2. 沸水浴5-10分鐘，或在PCR儀上100℃加熱5-10分鐘使DNA模版充分變性，立即放冰上待用。注意：如果PCR儀器不能設(shè)置到100℃，99℃加熱5分鐘也可。
3.高速離心數(shù)秒使所有液體集中在管底，根據(jù)試劑盒類型加入下列成份：

試劑盒類型	成分及用量
BTN90603A型	dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL，濃度均為2mM) 自備的2mM dTTP/標(biāo)記dUTP混合物(見注)1μL 1μl Klenow exo聚合酶
BTN90603B型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超純水
BTN90603C型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超純水

注：上表中的dTTP/標(biāo)記dUTP混合物中dTTP和標(biāo)記的dUTP的總濃度為2mM(在20μL體系中混合液的終濃度為0.1mM，dTTP與生物素或DIG標(biāo)記的dUTP的比例zuì好為65:35)。由于空間阻礙，并非標(biāo)記生物素或DIG標(biāo)記的dUTP越多靈敏度越高，一般dTTP與標(biāo)記dUTP的比例在65：35為zuì佳。但如果使用自備的其他標(biāo)記核苷酸，如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl標(biāo)記的dUTP，則用戶需要自己摸索其與dTTP之間的zuì佳比例，如果使用32P標(biāo)記的dUTP，則比活zuì好為3000Ci/mmol，濃度為好為10uCi/μL，并且不需要加入dTTP。
4. 輕柔吹打混勻。如有液滴沾在管壁上，高速離心數(shù)秒使所有液體集中在管底。
5. 37℃保溫1-20小時。標(biāo)記效率跟模版量和保溫時間相關(guān)，具體見下表：

模版DNA用量	1小時后探針合成量	20小時后探針合成量
10ng	80ng	900ng
30ng	150ng	1.35μg
100ng	350ng	1.65μg
300ng	750ng	2.2μg
1μg	1.3μg	2.6μg
3μg	1.6μng	2.6μg

6. 加1μl自備的0.5M EDTA(pH8.0)終止反應(yīng)，立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加熱100℃ 5分鐘使DNA探針變性成單鏈，然后直接加入到雜交反應(yīng)液中即可。如果電泳檢測，標(biāo)記產(chǎn)物將是彌散狀態(tài)。
 注意：本方法標(biāo)記核苷酸摻入率高，因此可以不經(jīng)純化直接使用。如果需要純化，注意不要用酚抽提法純化非同位素(生物素、DIG和其他等)標(biāo)記的DNA探針，因為這些標(biāo)記分子疏水性強，能使標(biāo)記的DNA進入疏水的有機相而丟失，但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另購非同位素探針柱式純化試劑盒)。對比活高的同位素探針，由于其其不穩(wěn)定，因此應(yīng)該立即使用，不要長久放置。

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