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熒光染料亮度排行匯總 古朵新聞√

發(fā)布時間:2020-06-28瀏覽次數(shù):1326返回列表

 熒光染料是細(xì)胞生物學(xué)等科學(xué)研究中不可或缺的重要工具,熒光濾色塊是熒光顯微鏡中至關(guān)重要的一個部件。我們大家在操作熒光染料亮度的時候,我們可以按照上面的比較方法去比較熒光染料的亮度,那么一般熒光染料亮度怎么進行比較?

 
       熒光染料的亮度可以用來比較不同熒光染料的熒光標(biāo)記效果,通過陰性細(xì)胞群與陽性細(xì)胞群的熒光信號之間的關(guān)系來表示。但陰性細(xì)胞群的熒光信號受到信號強度、自發(fā)熒光、非特異性染色、儀器的電子噪聲等多個因素相關(guān)。
 
       熒光染料染色指數(shù)是陽性細(xì)胞群的平均熒光強度與陰性細(xì)胞群的平均熒光強度之差與陰性細(xì)胞群熒光強度標(biāo)準(zhǔn)差之間比值的一半。熒光染料染色系數(shù)只和抗體克隆與質(zhì)量、熒光團純度與質(zhì)量、熒光修飾比、激光線及其功率、長通和帶通濾光片、目的細(xì)胞等因素相關(guān)。
 
       熒光染料的染色指數(shù)與熒光染料的亮度呈正相關(guān),也就是熒光染料亮度越高,染色系數(shù)也就高。
 
       DNA染料:
 
 
       圖1.用Cell Navigator?脂質(zhì)液滴熒光測定試劑盒(Cat#22735)和Nuclear Green?LCS1(Cat#17540)染色的油酸處理過的HeLa細(xì)胞的熒光圖像。
 
染料名稱 標(biāo)記部位 激光 濾光片組 亮度
DAPI(17510) DNA 355 nm DAPI 6
Nuclear Blue(17548) DNA 355 nm DAPI 6
Nuclear Green(17540) DNA 488 nm FITC 6
Nuclear Orange(17541) DNA 488 nm Cy3 6
Propidium Iodide(17515) DNA 532 nm Texas Red 3
Nuclear Red(17542) DNA 633 nm Cy5.5 6
 
       細(xì)胞增殖染料:
 
 
       圖2.用CytoTell?Green和CFSE進行的細(xì)胞增殖測定。在第0天,用CytoTell?Green或CFSE對Jurkat細(xì)胞(?2×106細(xì)胞/ mL)進行染色。在的那天,以1:1的比例連續(xù)通過細(xì)胞。在通過當(dāng)天,在FITC通道中用ACEA NovoCyte 3000流式細(xì)胞儀測量熒光強度。連續(xù)幾代人以不同的顏色代表。
 
染料名稱 功能 激光 濾光片 亮度
CytoTell Blue(22251) 增殖 405 nm DAPI 6
CFSE(22022) 增殖 488 nm FITC 7
CytoTell Green(22253) 增殖 488 nm FITC 7
CytoTell Orange(22257) 增殖 488 nm Cy3/TRITC 7
CytoTell UltraGreen(22240) 增殖 488 nm FITC 7
CytoTell Red 590(22261) 增殖 561 nm Cy3 7
CytoTell Red 650(22255) 增殖 633 nm Cy5 7
       細(xì)胞活力檢測染料
 
 
       圖3.用CytoCalcein Violet 500(Cat#22013)染色的活HeLa細(xì)胞圖像。細(xì)胞核用Hoechst 33342(Blue,Cat#17535)染色。
 
染料名稱 功能 激光 濾光片 亮度
Calcein Blue(22006) 細(xì)胞活力 405 nm DAPI 6
Calcein UltraBlue(21908) 細(xì)胞活力 405 nm DAPI 6
CytoCalcein Violet 450(22012) 細(xì)胞活力 405 nm DAPI 7
CytoCalcein Violet 500(22013) 細(xì)胞活力 405 nm FITC 7
Calcein(22001) 細(xì)胞活力 488 nm FITC 7
Calcein Orange(22008) 細(xì)胞活力 488 nm TRITC 7
Calcein UltraGreen(21905) 細(xì)胞活力 488 nm FITC 7
7-AAD(17501) 細(xì)胞活力 532 nm Cy5 2
Calcein Red(21900) 細(xì)胞活力 561nm Cy3/TRITC 7
Calcein Deep Red(21902) 細(xì)胞活力 633 nm Cy5 7
 
       熒光標(biāo)記染料
 
       圖4.將 HeLa細(xì)胞與(Tubulin +)或不與(Tubulin-)小鼠抗微管蛋白一起孵育,然后與iFluor?488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色,左)或AlexaFluor®488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色,右)。細(xì)胞核用Hoechst 33342(藍(lán)色)染色。

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