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非洲豬瘟病毒檢測現(xiàn)階段的三種主流檢測手段
發(fā)布時間:2019-06-24瀏覽次數(shù):1823返回列表
非洲豬瘟,猶如闖關(guān)游戲中后一關(guān)出場的“老母”,特點是動作緩慢、出手頻率低、招招致命!一旦入場,在沒有做好提前篩查、各舍交叉防護和科學(xué)的應(yīng)急預(yù)案時,病原擴散開來,很難徹底清除,后結(jié)局就是清場。非洲豬瘟主要感染途徑為口腔,病毒體內(nèi)復(fù)制過程為唾液→淋巴(扁桃體和下頜淋巴結(jié)次復(fù)制場所)→淋巴/血液(通道)→淋巴結(jié)、骨髓、脾、肺、肝、腎(病毒二次復(fù)制場所)→血液和組織(病毒量達(dá)到高峰)?,F(xiàn)階段的主流檢測手段主要有以下三種:
一、快速檢測試紙條
快速檢測試紙條操作簡單,成本低,無需配備價格昂貴的設(shè)備,但是準(zhǔn)確性不及熒光定量PCR檢測,同時一般只適合用于全血或內(nèi)臟組織等的檢測,需要注意采樣對象和方法。
快速檢測試紙條適合用于豬場進行初步篩查,一般進行多次采樣檢測,一旦檢測到非洲豬瘟病毒陽性,要及早處理懷疑病豬,并盡早將樣本送到實驗室進行確診。
二、熒光定量PCR檢測
熒光定量PCR檢測的優(yōu)點明顯,敏感度高、準(zhǔn)確率高,可用于環(huán)境樣本的檢測,也可多樣品混合檢測。但是同時其缺點也明顯,操作復(fù)雜、成本高,需要配備專業(yè)人士和專業(yè)設(shè)備,花費時間也比較長,單個樣本的檢測時間超過一個小時。如果操作失誤,對檢測結(jié)果影響大,同時有可能造成檢測實驗室污染。
由于熒光定量PCR檢測設(shè)備條件的限制,一般只鼓勵具備一定規(guī)模的豬場配置,進行日常篩查工作。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部也鼓勵規(guī)模豬場、種豬場配置檢測儀器設(shè)備,規(guī)范使用經(jīng)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)或經(jīng)動物疫病預(yù)防控制中心比對符合要求的檢測方法,自行開展非洲豬瘟檢測,提高排查工作的針對性和有效性。
三、核酸等溫擴增技術(shù)
核酸等溫擴增技術(shù)是一類核酸體外擴增技術(shù),其反應(yīng)過程始終維持在恒定的溫度下,通過添加不同活性的酶和各自特異性引物來達(dá)到快速核酸擴增的目的。
核酸等溫擴增技術(shù)是近幾年來興起,能在某一特定的溫度下擴增特定的DNA或者RNA。與傳統(tǒng)PCR技術(shù)相比,由于不需要升溫降溫,能夠在恒定溫度下實現(xiàn)擴增,對儀器的要求大大簡化,反應(yīng)時間大大縮短,能滿足快速簡便的需求,具有特異性高、分析速度快、成本低、突變率低的。
由于這項技術(shù)所具備的,可以實現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測,在非洲豬瘟形勢下無疑有利于不具備構(gòu)建規(guī)范實驗室條件的豬場檢測非洲豬瘟。