大鼠ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中大鼠IL-10的濃度。大鼠IL-10捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)本或參考品時，其中的大鼠IL-10會與捕獲抗體結(jié)合，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當(dāng)加入生物素化的抗大鼠IL-10抗體后，抗大鼠IL-10抗體與大鼠IL-10接合，形成夾心的免疫復(fù)合物，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素。生物素與親合素特異性結(jié)合，親合素連接的酶就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來；其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。后加入顯色劑，若樣本中存在IL-10將會形成免疫復(fù)合物，辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測，讀其450nm處的OD值，大鼠IL-10濃度與OD450值之間呈正比，通過參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對照未知樣本中OD值，即可算出標(biāo)本中IL-10濃度。今天，我們重點(diǎn)介紹本試劑盒須注意的相關(guān)知識點(diǎn)。

    關(guān)于大鼠ELISA試劑盒應(yīng)注意的一些知識點(diǎn)：
    1、濃縮洗滌液因在低溫下可能有結(jié)晶，請水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
    2、試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙復(fù)孔。
    3、底物請勿接觸氧化劑和金屬。
    4、加樣時，請及時更換槍頭，避免交叉污染。
    5、洗滌過程是至關(guān)重要的，洗滌不充分會使度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
    6、嚴(yán)禁混用不同批號的試劑盒組份。
    7、加樣過程中避免氣泡的產(chǎn)生。
    8、室溫反應(yīng)，請嚴(yán)格控制在25～28℃。
    9、充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的準(zhǔn)性很重要，在加液后請輕輕叩擊邊緣以保證混勻。
    10、血清和血漿標(biāo)本的檢測時，檢測抗體的孵育時間應(yīng)適當(dāng)延長。
    11、若標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后，請?jiān)谌靸?nèi)用完。
    12、大鼠ELISA試劑盒請保存在2～8℃。