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血小板裂解物真的能代替胎牛血清?

發(fā)布時間:2019-05-21瀏覽次數(shù):892返回列表

    胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有為重要的功能。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
    據(jù)報道人血小板裂解物(HPL)可以代替胎牛血清用于MSCs的大規(guī)模培養(yǎng)和制備,能滿足臨床應(yīng)用的需求。隨后有一系列的文章證明HPL能起到FBS的功能,促進MSCs的增殖擴增。這種的細胞增殖刺激使MSCs能夠在11-16天的單個培養(yǎng)周期內(nèi)進行大規(guī)模的臨床應(yīng)用,而不需要進一步的傳代,同時保持基因組的穩(wěn)定性。
    當(dāng)MSCs接種在羥基磷灰石-磷酸三鈣(HA/TCP)生物材料上生長,5%的HPL對牙髓MSCs的增殖有明顯的促進作用,然而,HPL的濃度提高到10%時,10%的HPL卻顯著抑制MSCs增殖;而且5%的HPL明顯促進MSCs在體內(nèi)和體外實驗的成骨分化。另有研究顯示任何濃度的HPL(1%-60%)促進脂肪MSCs增殖的效果均優(yōu)于10%的FBS,而且20%HPL的效果zui佳。HPL培養(yǎng)能提高脂肪MSCs的增殖和向軟骨分化,有利于治療修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷。活化的血小板釋放的細胞因子在腫瘤轉(zhuǎn)移和關(guān)節(jié)炎中也一些不好的作用。有報道稱骨髓MSCs在僅添加HPL的培養(yǎng)基中擴增效率較低。一些研究顯示血小板裂解物培養(yǎng)MSCs后,MSCs的成骨或成脂分化能力降低,以及表面標(biāo)志表達改變和降低MSC的免疫抑制能力。
    盡管血漿被認為含有許多營養(yǎng)物質(zhì)和生長激素和IGF-1等因子,但是缺乏血小板活化釋放的多種生長因子,因此單純的血漿很少用于培養(yǎng)MSCs的補充劑。血液經(jīng)過凝固后釋放出血清,因涉及血小板的激活,因而含有多種生長因子,但是血清樣本中生長因子的含量比濃縮血小板產(chǎn)生的HPL低30%至50%。
 

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